Recuperação de invertase através do sistema de duas fases aquosas

Resumo

A enzima invertase apresenta um forte apelo comercial devido a sua finalidade de catalisar a hidrólise da sacarose em glicose e frutose. Podendo ser aplicada em diversas indústrias como a de cosméticos, medicamentos, papel, alimentos e bebidas. Entretanto, um dos grandes desafios consiste em utilizar as enzimas em diferentes setores da indústria sem que seja necessário empregar métodos com custos elevados na sua produção e recuperação, uma vez que, os métodos convencionais para purificar biomoléculas geralmente incluem etapas muito complexas. Sendo assim, uma alternativa viável é extrair a molécula de interesse através de um sistema de duas fases aquosas. É neste sentido, que o presente trabalho tem o intuito de propor um método de recuperação para a enzima invertase a partir da utilização de um sistema de duas fases aquosa, tendo em vista simplicidade de execução, baixo custo e a alta seletividade. A metodologia proposta se baseia na obtenção invertase a partir da levedura Saccharomyces cerevisiae, na utilização do sistema de duas fases aquosa formada por um polímero e sal, na determinação da atividade da invertase pela concentração de açúcares redutores produzidos após o tempo de ensaio e a quantificação de açúcares redutores liberados será estimada pelo método do ácido dinitrosalicílico (DNS) e análise dos resultados através do Programa Statistix 10 e construção do gráfico de superfície de resposta pelo Programa Minitab Statistical Software. Os resultados das análises demonstram que a variável pH e o modelo são significativos, podendo o modelo ser representado por um linear, além de não apresentar falta de ajuste. Os melhores resultados para a recuperação em atividade enzimática da invertase foram obtidos quando se trabalhou com a concentração de 30% (p/p) para o PEG6000 e 15% (p/p) para o MgSO4 no pH 7,0, alcançando um valor máximo de 84,5%.